小T记得之前的推文《心梗模型与心肌缺血再灌注损伤模型的建模及结果》就已经介绍过心梗模型与心肌缺血再灌注损伤的建模了以及比较过两种模型的病理切片及超声结果。但当初并未附上这两个模型的建模视频，这不仅仅是当初推文的一个缺陷，也是小T心中的一点点遗憾。不过在这次推文中，小T终于可以把这个遗憾弥补上了。
视频来自俄亥俄州立大学生理学和细胞生物学系戴维斯心肺研究所ZhaobinXu等人制作。
实验步骤与此前推文所简述的相类似。详细实验步骤如下：
1.维持麻醉与气管插管
利用5%异氟烷混合气体以0.4L/min流速的量对小鼠进行诱导麻醉。
取仰卧位将小鼠固定于手术台上并用利用细线拉住门牙固定头部。
对颈部和心脏的手术部位进行消*及备皮。
剪开颈部皮肤暴露出气管便于观察留置针是否顺利插入气管内。
2.维持麻醉和手术体位固定
调节2%异氟烷混合气体以0.4L/min流速的量对小鼠进行维持麻醉。
设定呼吸机潮气量为ul/次，通气速率为/min。
改变小鼠体位以右侧卧位固定于手术台上以便于手术进行。
3.手术开胸
在小鼠心脏部位皮肤躲避开静脉进行一个长约1cm的切口。
逐层分离直至暴露出肋骨。
在第三肋骨的肋间打开胸腔
用预先消*好的拉钩将切口轻轻拉开。
撕开覆盖在心脏上的脂肪组织暴露出心脏。
4.LAD定位
在手术显微镜下观察心脏的各条血管，如果有需要可通过额外的光照使得各血管显示更清晰。
往心脏心耳处垫入棉花便于LAD与手术部位的更充分的暴露。
5.LAD结扎
用带线缝合针从LAD下方穿过
细线穿过后打一个松散的双结并在结中放置一个大小适合的PE管。
当PE管放置成功后打结固定。
当看到左心室前壁外表面变成苍白色时证明缺血成功。
取下牵引器将手术开口闭合进行缺血。
6.再灌注
缺血完成后插入拉钩重新暴露出心脏，解开绳结取下PE管，能观察到左心室前壁重新变为粉红色。
如果有需要，可以将缝合细线作为标志留置于心脏上，如果没有需要可直接取走。
根据实验时间设计对小鼠进行血液再灌注。
7.胸腔缝合及术后护理
关闭胸腔并用4-0丝线对肋间进行缝合并尽量减少心腔中留置的空气。
用4-0丝线对肌肉层及各手术部皮肤进行逐层缝合。
关闭异氟烷但维持空气通气。
当观察小鼠恢复自主呼吸后拔出气管插管。
给小鼠注射适量的镇痛消炎药后小鼠放回笼子内。
当实验按计划再灌注结束后对心肌梗死面积进行测量
切开胸部皮肤至剑突，剪开肋骨和锁骨中线两侧的腹部和隔膜，暴露出心脏。然后重新结扎同一位置，利用导管插入主动脉缓慢注入10％的酞菁蓝。
取下心脏放入氯化钾中进行清洗，冰冻心脏4h并将其切成1mm厚的切片。
将心脏切片用2%TTC在37℃中孵育40min，梗死区域显示白色，活组织显示红色。
利用10%甲醛固定液将切片固定过夜，增加梗死区与非梗死区的对比度有利于拍照计算。
采集小鼠血液，通过分离血清定量检测血清中cTnI的量。
图1：（A）酞青蓝染色，白色显示梗死区域，红色显示梗死边缘区，蓝色显示非梗死区域。（B）TTC染色，白色显示梗死区域，红色显示梗死边缘区，
图2：使用肌钙蛋白水平作为心肌梗死的程度的测量
推文开头就说了，这是弥补上一篇推文没有视频的遗憾，所以以下即为完整实验视频，希望对大家有用。
更多详细内容，可点击阅读原文！
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